Gram plet



Den information, vi har kunnet samle om Gram plet, er blevet omhyggeligt gennemgået og struktureret for at gøre den så nyttig som muligt. Du er sandsynligvis kommet her for at finde ud af mere om Gram plet. På internettet er det let at fare vild i et virvar af sider, der taler om Gram plet, men som ikke giver dig det, du gerne vil vide om Gram plet. Vi håber, at du vil fortælle os i kommentarerne, om du kan lide det, du har læst om Gram plet nedenfor. Hvis de oplysninger om Gram plet, som vi giver dig, ikke er hvad du søgte, så lad os det vide, så vi kan forbedre denne hjemmeside dagligt.

.

Den Gram-farvning skylder sit navn til den danske bakteriologen Christian Gram , der udviklede protokollen i 1884. Det er en plet, som gør det muligt at fremhæve egenskaberne for den bakterielle væg , og til at bruge disse egenskaber til at skelne og klassificere bakterier. Dens fordel er, at den giver hurtig, nem og billig information om de bakterier, der findes i et produkt eller medium, både med hensyn til type og form.

Således kan forskere skelne mellem Gram-positive bakterier - også kendt som "Gram-positive" - ​​med en enkelt væg med en stor mængde peptidoglycan fra gramnegative bakterier, der består af mindre peptidoglycan, men med en membran. Yderligere ekstern. Denne type klassificering er ikke uden konsekvenser inden for det medicinske område (resistens af bakterier og effektiviteten af ​​antibiotika afhængigt af typen af ​​bakterier).

Metodologi

Udfører udstrygningen

Det kræver enten at have en fast udstrygning

  1. ved nedsænkning i alkohol i 5 minutter (og skylles med vand),
  2. mere konventionelt ved at udføre en simpel varmefiksering: Anbring en dråbe sterilt vand på et dias (eller direkte prøven, hvis det er flydende). Dråbe i en isoleret koloni (hvis der er foretaget en isolering). Spredes ud og varmesætes med en plade ved omkring 40 ° C. Når det er tørt, skal du dække objektglasset med alkohol i et minut. Fjern alkoholen og sæt den til tørring på scenen. Placer det tørrede dias på stativet hviler på en farvningsskål.

Udførelse af farvning

Her er de forskellige faser af denne farve:

  1. Farvelægning med gentian violet eller crystal violet. Lad det virke i 30 sekunder til 1 minut, og skyl derefter med vand
  2. Ætsning af lugol (opløsning af iod- iodurée): lugol-dækning og efterlad samme tid som gentian violet; skyl med demineraliseret vand.
  3. Affarvning (hurtig) med alkohol (+ acetone ). Dette er det vigtigste trin i farvning. Hæld alkohol eller en alkohol-acetone-blanding dråbe for dråbe på det skråblad, og pas på hurtig misfarvning. Nettet skal være klart i slutningen af ​​misfarvningen. Skyl grundigt med deioniseret vand for at stoppe misfarvningen. Vær forsigtig, overdreven brug af alkohol vil resultere i at gøre alle gramnegative bakterier.
  4. Genfarvning med safranin eller fuchsin . Sæt destilleret vand på objektglasset og et par dråber fuchsin. Lad den virke i 30 sekunder til 1 minut. Vask forsigtigt med deioniseret vand. Tør objektglasset på en varmeplade ved 50 ° C.
  5. Overhold med en dråbe objektiv 100 nedsænkningsolie (forstørrelse × 1000).

Trin 1 og 2 farve indholdet af bakterierne lilla . Gentian violet binder til de cytoplasmatiske komponenter i alle bakterier. Lugol løser denne interne farve.

Trin 3 (alkohol) bruges til at affarve bakteriernes cytoplasma, som siges at være ”  gramnegativ  ”. Faktisk har disse en mur, der er fattig i peptidoglycaner - derfor tyndere - som vil lade alkoholen ( hydrofilt molekyle ) eller alkohol-acetone-blandingen passere, og som vil misfarve cytoplasmaet ved at fjerne gentianviolet. Tværtimod, for såkaldte “ Gram-positive ”  bakterier  udgør væggen en uigennemtrængelig barriere for alkohol, fordi den er sammensat af et større “lag” af peptidoglycaner. Væggen er derfor tykkere. Bakterierne forbliver derefter lilla i farven.

Trin 4 er en modfarve med det formål at give de tidligere misfarvede gramnegative bakterier en lyserød farvetone, der gør det muligt at visualisere dem under et mikroskop. Bakterierne Gram-positive forblev violer vil tydeligvis ikke være følsomme over for denne modfarve lysere end den lilla, der indebærer deres cytoplasma.

Gramplet gør det således muligt at differentiere bakterievæggen og opdele bakterierne i to store grupper:

  • Gram + som har en tyk peptidoglycanvæg (f.eks .: Bacillus cereus )
  • Gram - som har en tynd peptidoglycanvæg, men derudover har en ydre lipidmembran (f.eks. Escherichia coli ).

Disse forskelle i farve og forskellene i form ( bacillus eller cocci ) er oprindelsen til klassificeringen af ​​bakterier.

Bemærk  : Visse bakterier forbliver ufølsomme over for denne farvning, dette er blandt andet tilfældet med Mollicutes eller kaldet Ténéricutes, en af ​​de tre hovedklasser af Eubacteria (Gracilicutes, Firmicutes, Ténéricutes). Faktisk er disse bakterier blottet for væg og synes Gram -.

Anvendelse i mikrobiologi

Gram-plet bruges ofte i mikrobiologi til at detektere gram-positive eller negative bakterier. Dette gør det muligt at differentiere og klassificere de forskellige populationer af mikroorganismer. For eksempel, når der er mistanke om infektion af organismen i en biopsi, kan denne farvning bruges efterfulgt af en histopatologisk analyse til at stille en diagnose. Denne metode har den fordel, at den er hurtigere end en konventionel kultur.

De påviste bakterier klassificeres i to kategorier. Som eksempel:

  • Staphylococci og streptococci, Gram + bakterier, ser lilla ud;
  • Escherichia coli , en Gram-enterobacterium, fremstår som en lyserød / rød bacillus (afhængig af modfarvet fuchsin eller safranin).

Alternativ

'Gram KOH'

Formålet med denne metode er hurtigt at bekræfte, om en bakterie er Gram-positiv eller Gram-negativ uden at gå gennem de sædvanlige farvningstrin og uden at bruge et mikroskop. Det er tilstrækkeligt at kontakte (på et objektglas) en isoleret koloni med en dråbe af en 3% kaliumhydroxid ( KOH ) opløsning . Ved hjælp af en Pasteur-pipette blander vi. Et par sekunder senere trækker vi blandingen opad. Hvis der dannes en glødetråd mellem pipetten og objektglasset, består den isolerede koloni af gramnegative bakterier; hvis intet medfølges af pipetten, har vi at gøre med Gram-positive bakterier. Metoden blev foreslået som en kvalitetskontrol for Gram-pletten i 1977. Under en evaluering (John Buck, 1982) blev resultaterne opnået ved denne metode på 400 stammer af marine bakterier bekræftet af Gram-pletten.

Noter og referencer

  1. (i) David H. Bergey , John G. Holt, Noel R. Krieg og Peter HA Sneath, Bergey manual for Determinative Bakteriologi , Baltimore / Philadelphia / Hongkong etc., Lippincott Williams & Wilkins,9.  udgave. , 787  s. ( ISBN  0-683-00603-7 )
  2. (en-US) “  Gram - Histalim  ” , om Histalim (adgang til 29. april 2016 )
  3. Ny kvalitetssikringsprocedure for Gram-pletten Kohn, FS og SA Henneman. 1977 J. Am. Med. Technol. 39: 20-21
  4. Metode til ikke-farvning (KOH) til bestemmelse af gramreaktioner af marine bakterier JD Buck - Appl Environ Microbiol. 1982 okt; 44 (4): 992-993

Relaterede artikler

Vi håber, at de oplysninger, vi har indsamlet om Gram plet, har været nyttige for dig. Hvis det er tilfældet, så glem ikke at anbefale os til dine venner og familie, og husk, at du altid kan kontakte os, hvis du har brug for os. Hvis du på trods af vores bestræbelser mener, at det, vi har leveret om _title, ikke er helt korrekt, eller at vi bør tilføje eller rette noget, vil vi være taknemmelige, hvis du vil give os besked. At give den bedste og mest omfattende information om Gram plet og ethvert andet emne er essensen af denne hjemmeside; vi er drevet af den samme ånd, som inspirerede skaberne af Encyclopedia Project, og derfor håber vi, at det, du har fundet om Gram plet på denne hjemmeside, har hjulpet dig med at udvide din viden.

Opiniones de nuestros usuarios

Mette Nygaard

Jeg finder det meget interessant, hvordan dette indlæg om Gram plet er skrevet, det minder mig om min skoletid. Sikke en dejlig tid, tak fordi du tog mig med tilbage til dem.

Conny Pedersen

Min far udfordrede mig til at lave mine lektier uden at bruge Wikipedia, og jeg sagde til ham, at jeg kunne gøre det ved at søge på mange andre sider. Heldigvis fandt jeg denne hjemmeside, og denne artikel om Gram plet hjalp mig med at løse mine lektier. Jeg var næsten fristet til at gå til Wikipedia, da jeg ikke kunne finde noget om Gram plet, men heldigvis fandt jeg det her, for så tjekkede min far min browserhistorik for at se, hvor jeg havde været. Kan du forestille dig, hvis jeg kom ind på Wikipedia? Heldigvis fandt jeg dette websted og artiklen om Gram plet her. Det er derfor, jeg giver dig mine fem stjerner

Erik Enevoldsen

Det er en god artikel om Gram plet. Den giver de nødvendige oplysninger uden overdrivelser