Endonuklease

En endonuklease er en nuklease , der skærer en nukleinsyre i kortere fragmenter. Endonukleaser er i stand til at skære i midten af ​​kæden i modsætning til exonukleaser, som kun angriber de nukleotider, der er placeret i enderne af fragmenterne.

Visse endonukleaser kaldes restriktionsendonucleaser er restriktions -enzymer , der skærer en dobbeltstrenget - strenget DNA -streng på steder kendetegnet ved en specifik sekvens af nukleotider  : restriktionsstedet. Vi taler om DNA-fordøjelse.

I EF-nomenklaturen klassificeres disse enzymer i grupperne fra EC3.1.21 til EC3.1.27, de første fem svarer til endodeoxyribonukleaser og de sidste to til endoribonukleaser .

Anvendelser

Når DNA-strengen er spaltet, kan vi finde os i to tilfælde:

• sammenhængende ende, med stumpe kanter, skærer enzymet det samme sted på de 2 tråde, som det er tilfældet med Hae III, som skærer GG / CC. I dette tilfælde kan de således oprettede tråde ikke matches igen.
• sammenhængende ender med klæbrige kanter klipper restriktionsenzymet ikke midt i dets restriktionssekvens, som det er tilfældet med EcoRI, der genkender G / AATTC-sekvensen.

Fra identiske ikke-sammenhængende ender er det muligt at samle to DNA-fragmenter ved anvendelse af en ligase . Dette kan f.eks. Anvendes til at indsætte en DNA-sekvens i et plasmid for at generere en ekspressionsvektor.

Cas9 er en endonuklease, der bruges til let og hurtigt at modificere genomet af dyre- og planteceller

Noter og referencer

1. CHUPS - Gene biologi - Mål under IFTAB grunduddannelse ( 2 nd  år) University diplom P. og M. Curie Efteruddannelse

Relaterede artikler

• Nuclease
  • Exonuklease
  • Endonuklease
• Deoxyribonuklease
  • endodeoxyribonuklease
  • Exodeoxyribonuklease
• Ribonuklease
  • Endoribonuklease
  • Exoribonuklease

Andet

• Meganukleaser
• Restriktionsenzym