Den archaea \ aʁ.ʃe \ eller Archaea (den gamle græske ἀρχαῖος , "original, primitiv"), tidligere kendt som Archaea , er mikroorganismer cellet prokaryoter , det vil sige, levende væsener består af en celle kun, der ikke indeholder kerne eller organeller , som bakterier . Ofte ligner udseendet på sidstnævnte, blev arkæer længe anset for at være særlige ekstremofile bakterier , indtil fylogenetisk forskning på prokaryoter , der blev påbegyndt i 1965, blev afsluttet med Carl Woese og George E. Fox. Med offentliggørelsen i 1977 af en fylogenetisk træ baseret på sekvenserne af gener for ribosomalt RNA fra de undersøgte organismer, hvor skaftprokaryoter blev opdelt i to forskellige områder , det for bakterier og det for arkæer . Vi ved i dag, at det eukaryote træ stammer fra arkæerne i Asgård . Således danner arkæerne en klade med Eukaryota, men udgør en parafyletisk gruppe placeret ved bunden af sidstnævnte.
Fra synspunktet med deres genetik , biokemi og molekylærbiologi er arkæer organismer, der er så forskellige fra bakterier som fra eukaryoter . De enzymer , der udfører DNA-replikation , den transkription af DNA i RNA samt oversættelse af messenger-RNA i proteiner i archaea er relateret til dem i eukaryoter og ikke til dem af bakterier, som er tilstedeværelsen af histoner i genetisk materiale af archaea bringer dem tættere på eukaryoter og adskiller dem fra bakterier. Derudover har archaea- generne introner, og deres messenger-RNA gennemgår ændringer efter transkription , hvilket også er tilfældet i eukaryoter, men ikke i bakterier. På den anden side har nogle arkæer metaboliske veje , der ikke findes i bakterier eller eukaryoter, såsom methanogenese i methanogen arkæer , mens arkæer som helhed er blottet for fedtsyresyntase , i modsætning til methanogenese. Både bakterier og eukaryoter: de gør meget begrænset anvendelse af fedtsyrer , og deres plasmamembran består hovedsageligt af etherlipider , i modsætning til bakterier og eukaryoter. Et andet træk specifikt for archaea er tilstedeværelsen i nogle af dem af en cellevæg bestående af pseudopeptidoglycan eller pseudomurin .
Archaea er længe blevet set som i det væsentlige ekstremofile organismer , der især findes i oceaniske hydrotermiske ventilationskanaler , vulkanske varme kilder eller endda saltsøer , men de er siden blevet opdaget i en række biotoper, som ikke nødvendigvis er ekstreme, såsom jorden , havvandet , af sumpe , tarmflora og oral og endda menneskelig navle . Archaea siges at være særligt mange i havene, og de der udgør en del af planktonet udgør en af de mest rigelige grupper af organismer på jorden . Archaea involverede også i ringe grad ringcarbon- og nitrogencyklus . Vi kender ikke rigtig noget eksempel på patogene eller parasitære buer , men de er ofte mutualistiske eller kommensale . De metanogene arkæer i den menneskelige tarm og drøvtyggere deltager således positivt i fordøjelsen .
Archaea er generelt ens i størrelse og form til bakterier, selvom nogle arter af archaea udviser en usædvanlig form, såsom Haloquadratum walsbyi, som har en flad firkantet celle. På trods af disse visuelle ligheder med bakterier adskiller arkæer sig ved visse biokemiske tegn , såsom sammensætningen af cellemembranen . Derudover udviser de gener og metaboliske veje svarende til dem, der findes i eukaryoter , inklusive enzymer involveret i DNA-replikationsmekanismen , transkription og translation . Archaea bruge et større udvalg af energikilder end eukaryoter: en organisk forbindelse som sukkerarter , ammoniak , metal -ioner og endda hydrogen gas som næringsstoffer. Den Haloarchaea brug sollys som energikilde, og nogle archaea arter kan binde kulstof imidlertid modsætning planter og cyanobakterier , ingen archaea kendte arter, der kan indse disse to fænomener. Archaea reproducerer aseksuelt og deler sig ved binær fission , fragmentering eller spirende. I modsætning til bakterier og eukaryoter er ingen arter af arkæer, der hidtil er identificeret, i stand til at danne sporer .
Arkæerne er meget forskellige. Nogle er kendt for deres evne til at leve under ekstreme forhold og besætte økologiske nicher, som de ofte er de eneste, der besætter ( pH tæt på 0, temperatur over 100 ° C , for eksempel høj saltholdighed), men der er mange arkæer, der lever i mere almindelige og meget varierede biotoper som jord, søer, havet eller tarmene hos dyr. De vil bidrage med op til 20% af den samlede biomasse . Disse prokaryoter er nu godt anerkendt som en vigtig del af at leve på jorden, de kan spille en rolle i kulstofcyklussen og kvælstofcyklussen . Der er intet klart anerkendt eksempel på patogen eller parasitisk archaea , men der er mutualistiske eller kommensale arter . For eksempel deltager methanogen arkæer fra tarmkanalen hos mennesker og drøvtyggere i fordøjelsen af mad. Arkæer er også vigtige inden for teknologi, for eksempel ved brug af methanogener til produktion af biogas eller deres deltagelse i spildevandsrensning . Derudover udnyttes enzymerne til ekstremofil archaea , der er resistente over for høje temperaturer og organiske opløsningsmidler, inden for bioteknologi .
I begyndelsen af XX th århundrede , blev prokaryoter betragtes som en enkelt gruppe af organismer og klassificeret baseret på deres biokemi , deres morfologi og stofskifte . For eksempel forsøgte mikrobiologer at klassificere mikroorganismer på baggrund af deres cellevægsstrukturer , deres former og de stoffer, de spiser. Imidlertid blev der foreslået en ny tilgang i 1965, som gør det muligt at undersøge forholdet mellem prokaryoter ved hjælp af sekvenserne af generne i disse organismer. Denne tilgang, kendt som fylogenetik , er den metode, der anvendes i dag.
Arkæer blev først klassificeret som en separat gruppe fra prokaryoter i 1977 af Carl Woese (professor ved University of Illinois i Urbana i USA) og George E. Fox i fylogenetiske træer baseret på sekvenser af 16S ribosomalt RNA ( rRNA ) gener. Disse to grupper blev oprindeligt navngivet eubakterier og arkæobakterier og behandlet som et underrig eller kongerige . Woese hævder, at denne gruppe af prokaryoter er grundlæggende forskellige fra bakterier. For at understrege denne forskel og for at understrege det faktum, at de sammen med eukaryoter udgør tre meget forskellige domæner af levende ting, blev disse to domæner senere omdøbt til Archaea og Bacteria . Ordet archaea kommer fra det antikke græske ἀρχαῖα , hvilket betyder "gamle ting". For deres del, andre som Thomas Cavalier-Smith mente, at archaea, dengang hed urbakterier , er kun en gren ( phylum ) af Unibacteria i riget af bakterier.
I første omgang kun metanogene bakterier , der oprindeligt er isoleret fra Carl Woese , blev placeret i dette nye domæne og archaea blev anset extremofiler der kun eksisterer i habitater såsom varme kilder og saltsøer : Woese opdaget i 1979 hyperhalophiles (slægten Halobacterium ) derefter thermoacidophiles ( Thermoplasma acidophilum , Sulfolobus acidocaldarius ), Karl Stetter isolerede i 1981 en anaerob hypertermofil archaea , Pyrococcus furiosus . Ved slutningen af det XX th århundrede , mikrobiologer indså, at archaea er faktisk en stor og forskelligartet gruppe af organismer, der er udbredt i naturen, og som er almindelige i mange forskellige habitater, såsom jord og havene. Denne nye forståelse af arkæernes betydning og allestedsnærværelse blev muliggjort af polymerasekædereaktionen til at detektere prokaryoter i vand eller jordprøver fra deres nukleinsyrer. Dette muliggør påvisning og identifikation af organismer, der ikke kan dyrkes i laboratoriet, eller hvis kultur er vanskelig.
Disse organismer er længe blevet grupperet under det generiske udtryk " prokaryoter " med bakterier . For at differentiere dem havde mikrobiologer udviklet et system til sammenligning og klassificering baseret på små forskelle, der er synlige under et mikroskop, samt fysiologiske forskelle (f.eks. Evne til at udvikle sig i et bestemt miljø).
Så snart det var et spørgsmål om at belyse de slægtsforskningsforhold mellem de forskellige prokaryoter, måtte biologer se fakta: ernæringsmæssige og fænotypiske forskelle tillader ikke, at de forskellige organismer klassificeres korrekt. I løbet af 1970'erne blev biologer opmærksomme på den uerstattelige eksistens af information i hjertet af cellerne i levende væsener, hvilket gjorde det muligt at bestemme fylogenien , DNA'et. Den gen identificeret i en celle er variant af et gen, der eksisterede mange, mange år siden. Gen-til-gen-sammenligningen mellem to organismer gør det derfor muligt at måle den forløbne tid siden afvigelsen fra den fælles forfader.
Carl Woese indså, at det ribosomale RNA (eller rRNA, et af molekylerne indeholdt i cellen) af de organismer, han studerede, gjorde det muligt at demonstrere eksistensen af to klart adskilte grupper: bakterier og arkebakterier. Specifikt er archaea-rRNA'er faktisk lige så forskellige fra bakterielle rRNA'er som de er fra eukaryoter. Woese konkluderede, at det ikke længere kun var nødvendigt at adskille den levende verden i to store grupper efter tilstedeværelsen eller fraværet af en kerne, men snarere i tre primitive domæner : bakterier, arkæer og eukaryoter.
Talrige undersøgelser bekræfter den monofyletiske karakter af gruppen bestående af archaea og eukaryoter (men ikke archaea alene). Disse mikroorganismer ligner bakterier i form, men fra et molekylært synspunkt, mens nogle af deres træk bringer dem tættere på bakterier, ligner andre mere eukaryoter. Det er derfor ikke muligt at præsentere arkæer som forfædre til bakterier.
Klassificeringen af arkæer og prokaryoter generelt er både i hurtig udvikling og et omstridt område. Baseret på metaboliske kriterier alene er arkæer blevet opdelt i fire hovedgrupper alt efter, om de er metanogene , halofile , termofile eller sulfoafhængige.
Nuværende klassificeringssystemer har til formål at organisere arkæer i grupper af organismer, der har fælles strukturelle egenskaber og forfædre. Disse klassifikationer er stærkt afhængige af anvendelsen af sekvensen af generne af ribosomalt RNA for at afsløre forhold mellem organismer (molekylær fylogenetik). Mest dyrkede arkæer er medlemmer af to hovedgrene : Euryarchaeota og Crenarchaeota . Andre grupper er midlertidigt oprettet. For eksempel blev de egne arter Nanoarchaeum equitans , som blev opdaget i 2003, klassificeret i en ny fylum : Nanoarchaeota . En ny fylde, Korarchaeota , er også blevet foreslået; den indeholder en lille gruppe usædvanlige termofile arter, der deler de to hovedphylers karakteristika, men som er tættere forbundet med Crenarchaeota . For nylig afsløret er andre arkæale arter, såsom de arkaeal Richmond Mine acidofile nanoorganismer (ARMAN), som blev opdaget i 2006, kun fjernt beslægtet med andre tidligere kendte grupper. Superphylum TACK blev foreslået i 2011 for at gruppere Thaumarchaeota , Aigarchaeota , Crenarchaeota og Korarchaeota .
Loki archea , identificeret i 2015 ved sit genom kvalificeret som Candidatus i bakterienomenklaturen , ville fra fylogenetisk synspunkt høre til den gren, der er tættest på eukaryoter . Nye arkaaræer, der er relateret til Loki , er blevet identificeret i vandbundsedimenter ved metagenomisk analyse . Arkæerne Odin , Thor og Heimdall ville dannes med Loki , supergrenen Candidatus "Asgard", der blev foreslået i 2017 efter navnet på kongeriget af guderne i den nordiske mytologi . En anden NCBI- undersøgelse indikerer, at arkæerne af Asgård og Eukaryotes danner en monofyletisk klade ved navn Eukaryomorpha .
Ifølge LPSN:
og foreslået
Ifølge Tom A. Williams et al. , 2017 og Castelle & Banfield, 2018 (DPANN):
Neomura |
|
||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||
Selvom de kendte fossiler af prokaryote celler er dateret til næsten 3,5 milliarder år siden, har de fleste prokaryoter ikke særprægede morfologier, og fossilernes former kan ikke bruges til at identificere dem som arkæer. På den anden side giver kemiske fossiler, i form af lipider, der er karakteristiske for arkæer, mere information, fordi disse forbindelser ikke findes i andre grupper af organismer. Nogle publikationer har antydet, at fossile lipider fra prokaryoter eller eukaryoter var til stede i skifer, der daterede 2,7 milliarder år tilbage. Siden da er disse data imidlertid blevet sat i tvivl. Disse lipider er også blevet påvist i klipper, der stammer fra prækambrium . De ældste kendte spor af disse isopreniske lipider kommer fra Isua-dannelsens klipper i Vestgrønland , som inkluderer sedimenter dannet for 3,8 milliarder år siden, og som er de ældste på jorden.
En eksperimentel fossilisering startede ud fra princippet om, at de første fossiler (> 3 Ga ) blev dannet ved silificering, dvs. via udfældning af silica på cellulære strukturer). Vi har i laboratoriet fossiliseret forskellige stammer af buer ( Methanocaldococcus jannaschii (en) og Pyrococcus abyssi ) og bakterier ( Chloroflexus aurantiacus (en) og Geobacillus (en) sp.) Betragtes tæt på mikroorganismer (termofiler, anaerober og autotrofer), som koloniserede. den primitive jord (og tæt på organismer, der muligvis kunne have levet på planeten Mars ). Deres observation ved elektronmikroskopi (SEM, TEM, Cryo-SEM) gav nyttige morfologiske indikationer for placeringen af ægte gamle fossiler (ikke at forveksle med præbiotiske strukturer såsom submikrometriske kugler, rør og filamentøse eller tilsyneladende fibrøse elementer. Muligvis fra en simpel organisk kemi); det samme ved kemiske analyser (GC, GC-MS, HPLC) leverede data om nedbrydning / konservering af organisk materiale under denne fossiliseringsproces ved silificering. Dette arbejde bekræftede, at visse mikroorganismer, der ikke silicify selv: dermed archaea M. jannaschii hurtigt lyseres mens P. abyssi, Geobacillus sp. og C. aurantiacus silicificeret, men med en intensitet, der er specifik for hver art. Nogle af disse mikroorganismer under silificering forsøger at overleve der ved at producere EPS Eller via en silicaafvisende mekanisme. De allerede opdagede fossiler er derfor ikke nødvendigvis repræsentative for de arter, der faktisk var til stede på det tidspunkt (heller ikke for deres antal eller dominans).
Woese foreslår, at bakterier, arkæer og eukaryoter hver især repræsenterer en separat slægt, der ville have afvundet fra en forfædre koloni af organismer. Andre biologer, såsom Gupta eller Cavalier-Smith, har imidlertid hævdet, at arkæer og eukaryoter stammer fra en gruppe bakterier. Det er muligt, at den sidste fælles forfader til bakterier og arkæer var en termofil organisme, hvilket rejser muligheden for, at liv dukkede op under høje temperaturer. Denne hypotese er imidlertid ikke godkendt af hele det videnskabelige samfund. På den anden side, da arkæer og bakterier ikke er mere beslægtede med hinanden, end de er med eukaryote celler, fører dette til argumentet om, at udtrykket prokaryot ikke har nogen reel evolutionær betydning og bør afvises fuldstændigt.
Forholdet mellem arkæer og eukaryoter er fortsat et vigtigt emne. Ud over lighederne i cellestruktur og biokemiske mekanismer, som diskuteres nedenfor, grupperer mange fylogenetiske træer arkæer og eukaryoter sammen. Nogle af de tidlige analyser har endda antydet, at forholdet mellem eukaryoter og arkæer i Euryarchaeota phylum er tættere end forholdet mellem Euryarchaeota og Crenarchaeota phylum . Imidlertid anses det nu for mere sandsynligt, at forfædren til eukaryoter divergerede tidligt fra den fælles forfader med archaea. Opdagelsen af gener fra arkæer i genomet af visse bakterier, såsom Thermotoga maritima , gør forholdet mellem organismer endnu vanskeligere at bestemme, da vandret genoverførsel har fundet sted. Arkeaniske gener i eukaryote genomer kunne også komme fra vandret overførsel.
En helt anden teori, der ikke er baseret på de fælles aksiomer af fælles stamfader og trædifferentiering, er den endosymbiotiske teori . Ifølge dette udviklede eukaryoter sig fra en fusion mellem bakterier og arkæer, i sig selv en fusion som følge af udviklingen af et symbiotisk forhold . Denne teori er bredt accepteret i dag på grund af de mange kendte fakta, der understøtter den. I archaea er den nærmeste gruppe eukaryoter superphylum af archaea til Asgård ( Asgardarchaeota ). Deres genom koder for en række proteiner, der er identiske med eller ligner proteiner, der menes at være specifikke for eukaryoter, og især det actin, som danner cytoskeletet . De mitokondrier kommer fra for deres del af den endosymbiotiske en rhodobactérie (en) (en alfa- Proteobacteria ).
Archaea har normalt et enkelt cirkulært kromosom . Det hidtil største arkeanske genom sekventeret er Methanosarcina acetivorans med 5.751.492 basepar, mens genomet af Nanoarchaeum equitans , den mindste sekvenserede til dato Er en tiendedel af denne størrelse med kun 490.885 basepar . Det anslås, at genomet af Nanoarchaeum equitans indeholder 537 gener, der koder for proteiner . Ekstrakromosomale elementer, kaldet plasmider, er også til stede i arkæer. Disse plasmider kan overføres mellem celler ved fysisk kontakt i en proces, der kan ligne bakteriekonjugering .
Reproduktion af arkæer forekommer aseksuelt ved binær opdeling, multipel fission eller fragmentering. Den meiose opstår ikke, alt afkom har samme genetiske materiale. Efter DNA -replikation af kromosomer adskilles, og de celle deler. Detaljer om cellecyklus af arkæer har været genstand for få undersøgelser i slægten Sulfolobus . Denne cyklus har tegn, der ligner både eukaryote og bakterielle systemer. Afhængigt af arkaearten replikeres kromosomer fra et eller flere udgangspunkter ( replikationens oprindelse ) ved hjælp af DNA-polymeraser, der ligner de tilsvarende eukaryote enzymer . Imidlertid ligner celledelingsproteiner, såsom det filamenterende temperaturfølsomme mutante Z ( FtsZ) protein , som danner en sammentrækningsring omkring cellen, og de spirende septumkomponenter i hjertet af cellen deres bakterieækvivalenter.
Hvis der er sporer i bakterier og eukaryoter, er de aldrig blevet demonstreret i alle kendte arkæer. Nogle arter af Haloarchaea kan gennemgå fænotypiske ændringer og vokse med forskellige typer celler, herunder tykke vægge. De strukturer, der er resistente over for osmotisk chok (in), tillader arkæer at overleve i vand med lave saltkoncentrationer, men disse er ikke reproduktive strukturer, og de kan hjælpe med at sprede sig til nye levesteder.
Arkæer er meget forskellige, både morfologisk og fysiologisk. De er encellede væsener med en størrelse, der varierer mellem 0,1 og 15 µm , men nogle udvikler sig til at danne filamenter eller aggregater (filamenter op til 200 µm ). De kan være sfæriske ( skaller ), spiraler, stangformede (baciller), rektangulære osv.
De viser en stor mangfoldighed af former for reproduktion ved binær fission, spirende eller fragmentering.
Fra et ernæringsmæssigt synspunkt er de opdelt i mange grupper, fra kemilithoautotrofer (der stammer deres energi fra kemiske gradienter af ikke-biologisk oprindelse) til organotrofer .
Fra et fysiologisk synspunkt kan de være aerobe , fakultative anaerobe eller strengt anaerobe.
Archaea findes i en bred vifte af levesteder og er en vigtig komponent i planetens økosystemer . De kan bidrage med op til 20% af mikrobielle celler i havene. Mange arkæer er ekstremofile , og ekstreme miljøer blev oprindeligt betragtet som deres økologiske niche . Faktisk lever nogle arkæer ved høje temperaturer, ofte over 100 ° C , som man møder i gejsere , sorte rygere og oliebrønde. Andre findes i meget kolde levesteder og andre i meget salt, surt eller alkalisk vandmiljø. Imidlertid er andre arter af Archaea mesofile og vokser under meget mildere forhold i sumpe , spildevand , have og jord .
Ekstremofil archaea er medlemmer af de fire vigtigste fysiologiske grupper. Disse er halofiler , termofiler , alkalofiler og acidofiler . Disse grupper har ingen forbindelse med deres gren i fylogenetisk klassificering. Ikke desto mindre er de et nyttigt udgangspunkt for klassificering.
Halofiler, for eksempel slægten Halobacterium , lever i saltvandsmiljøer, såsom saltsøer ( Great Salt Lake of Utah), kysten, saltmyrer, Det Døde Hav med saltkoncentrationer op til 25%. Medlemmer af ordre af halobacteriales ( Haloferax , Halobacterium , halococcus , Halorubrum , Natrinema , natronococcus ...) er eksempler på salt-tolerante archaea. De har ofte en rød til gul pigmentering på grund af carotenoider og er ansvarlige for farvningen af visse søer ( Magadi-søen i Kenya f.eks.). Termofiler trives bedst ved temperaturer over 45 ° C på steder som varme kilder; hypertermofile archebakterier defineres som dem, der trives bedst ved en temperatur over 80 ° C . Pyrococcus , Methanopyrus , Thermococcus , Sulfolobus , Pyrodictium er eksempler på hypertermofil archaea. Pyrobaculum kommer fra dybe reservoirer af varm olie. Pyrolobus fumarii er i stand til at multiplicere til 113 ° C . En nylig undersøgelse viste, at stammen 116 af Methanopyrus kandleri vokser til 122 ° C , hvilket er den højeste registrerede temperatur, hvor en krop stadig er i stand til at vokse. Andre arkæer kan vokse under meget sure eller alkaliske forhold. For eksempel er en af de mere ekstreme acidofile archebakterier er Picrophilus torridus , som vokser ved en pH på 0, hvilket svarer til 1,2 mol af svovlsyre .
Nyere undersøgelser har vist, at arkæer ikke kun findes i mesofile og termofile miljøer, men også ved lave temperaturer, undertiden i stort antal. Således er arkæer almindelige i kolde oceaniske miljøer som polarhav. Arkæer er faktisk til stede i stort antal i alle verdenshavene i planktonsamfundet (som en del af picoplankton ). Selvom disse arkæer kan udgøre op til 40% af den mikrobielle biomasse, er næsten ingen af disse arter blevet isoleret og undersøgt i ren kultur . Derfor er vores forståelse af arkæernes rolle i havøkologien rudimentær, så deres indflydelse på globale biogeokemiske cyklusser forbliver stort set uudforsket. Nogle marine Crenarchaeota er i stand til nitrifikation , hvilket tyder på, at disse organismer spiller en vigtig rolle i den oceaniske kvælstofcyklus , selvom de også kan bruge andre energikilder. Et stort antal arkæer er også til stede i sedimenterne, der dækker havbunden og vil udgøre flertallet af levende celler i dybder på mere end en meter i disse sedimenter. De metanogene arkæer (producerende metan) fra sumpene er ansvarlige for gassen fra sumpene (f.eks. Poitevin). Mange methanogene arkæer er til stede i fordøjelseskanalen hos drøvtyggere ( Methanomicrobium , Methanosarcina ), termitter eller mennesker . Undersøgelser af navelfauna (mikroorganismer, der lever i den menneskelige navle) har vist tilstedeværelsen af arkæer på dette sted.
Indtil i dag er der ingen klar demonstration af, at der er patogene arkæer , selvom der er blevet foreslået en sammenhæng mellem tilstedeværelsen af metanogen arkæer og periodontal sygdom .
Selvom et stort antal arkæer ikke kan dyrkes i laboratoriet i dag, kan mange arter dyrkes ved hjælp af egnede dyrkningsmedier og ved at reproducere miljøforholdene i deres naturlige levesteder så godt som muligt. Virkningerne af arkæer til stede i den menneskelige navle er endnu ikke undersøgt.
Archaea ligner bakterier i mange aspekter af deres cellulære struktur og metabolisme . Imidlertid viser mekanismerne og proteinerne, der er involveret i replikations- , transkriptions- og translationsprocesser , træk svarende til dem, der findes i eukaryoter . Særlige egenskaber ved archaea sammenlignet med de to andre domæner af levende ting (bakterier og eukaryoter) er som følger: