Legionella

Legionella Beskrivelse af dette billede, også kommenteret nedenfor Kultur af Legionella sp. under UV Klassifikation
Reger Bakterie
Afdeling Proteobakterier
Klasse Gamma Proteobakterier
Bestille Legionellales
Familie Legionellaceae

Venlig

Legionella
Brenner et al. , 1979

Bakterier af slægten Legionella , Legionella , er bacilli gramnegative .

Økologi

Disse er bakterier er naturligt til stede i vand og slam , der er ansvarlige for en respiratorisk sygdom , legionærsyge . De ofte kolonisere ad vandvej, især varmt brugsvand netværk , klimaanlæg og luft køletårne (TAR).

Spredningsforhold

Legionella udvikler sig og formerer sig:

Legionella formere sig svagt under 20  ° C , stoppe reproduceringen ved 55  ° C og destrueres fra 60  ° C (ifølge en meget præcis kontakttid) til øjeblikkelig destruktion fra 70 - 74  ° C .

Betingelser, der er nødvendige for forurening

Tilstedeværelsen af ​​Legionella i vandet er ikke en tilstrækkelig tilstand til at forårsage sygdommen. Tre faktorer skal være til stede:

Intet tilfælde af legionellose er blevet diagnosticeret efter indtagelse af forurenet vand, og der har heller ikke været tilfælde af transmission mellem mennesker og mennesker. Mængden af ​​bakterielt inokulum ser ikke ud til at påvirke udviklingen af ​​legionellose. Endelig blev klimafaktorer inkrimineret (kraftig regn og fugtighed, tilfælde af tilfælde om sommeren).

Desuden kræves humane værtsrelaterede følsomhedsfaktorer til sygdomsudvikling, skønt de ikke er fuldt forstået på nuværende tidspunkt. Risikofaktorer kan dog individualiseres: avanceret alder, immunitetsunderskud (kræft / hæmopati, diabetes), men frem for alt rygning. Infektion er undtagelsesvis beskrevet hos børn.

Grænser eller tærskler, der ikke må overskrides under vandanalyser

Grænseværdien ikke overskrides 1000  CFU / liter af Legionella pneumophila til varmt vand (VV) og til luft-køletårne (TAR), nye AFNOR NF T90-431 standard af november 2014 reviderede i august 2017 . For ART er der indstillet 3 tærskler: <1000  CFU / l  ; mellem 1.000 og 100.000  CFU / l og> 100.000  CFU / l . De sidste to tærskler kræver helbredende handlinger fra operatørens side. Endelig kan resultaterne gengives i form af Interfering Flora.

I Europa anslås det, at 90% af legionellose er knyttet til arten L. pneumophila, og at i gennemsnit 85% udelukkende skyldes serogruppe 1. Serogrupper 2 til 15 deler de resterende 10%. Tværtimod er det i Australien longbeachae- arten, der er ansvarlig for de fleste tilfælde af legionellose. Endelig er der 51 andre arter i slægten Legionella, der almindeligvis kaldes Legionella spp, og hvis infektiøse risiko diskuteres af hygiejnister og specialister i infektionssygdomme. Tilstedeværelsen af Legionella spp viser imidlertid, at netværksforholdene er optimale til multiplikation af legionella og derfor potentielt af Legionella pneumophila .

Der er omkring 6.000  sager om året i Europa og mellem 1.200  sager og 1.600 tilfælde om året i Frankrig med en dødelighed på mellem 10 og 15% på trods af passende antibiotisk behandling (143 dødsfald til 1.262  tilfælde rapporteret i 2013 og udviklingen af som er kendt kun i 1.168  tilfælde , dvs. en dødelighed på 12,2%) (fluoroquinoloner eller makrolider).

Legionella økologi

Den Legionella er hydro-tellursyre oprindelse. Deres naturlige habitat er repræsenteret af naturlige eller kunstige vandmiljøer. Det opholder sig der blandt andet i biofilmene (organiske og mikroorganiske rester dannet i rørene og på overfladen af ​​stillestående vand), der beskytter det mod klorering og synes at spille en vigtig rolle for dets overlevelse i installationerne. Det findes også i biofilm fra husholdningssystemer, undertiden forbundet med Pseudomonas aeruginosa . Udover vandets natur (surhedsgrad, mineralisering, organisk stof og næringsstofindhold) spiller temperaturen og typen af ​​materialer, der anvendes i VVS, også en vigtig rolle i dannelsen af ​​biofilm.

Biofilmen udvikler sig især i:

Desuden ferskvand protozoer (herunder amøbe ) repræsenterer den naturlige vært af Legionella inden den udfører en fase af dets livscyklus. Bakterien og dens vært har oplevet evolutionskonvergerende, så bakterierne er erhvervet i sin genetiske arv af gener, der koder de fleste virulensfaktorer for legionella. Legionellas opførsel og virulens i deres mikrobielle miljø er stadig dårligt forstået (for eksempel deres kapacitet til at invadere visse protozoer) og amøber såvel som selve deres miljø: økosystem af biofilm i særdeleshed, interaktioner med andre arter., Vandturbulens i netværk  osv. De ANSES sagde i 2011, at "overvågning protozoer (amøber og ciliater) i faciliteter og deres bidrag til farlighed faciliteter i fare er for stort set forsømt" .

Risiciene

Legionellose kan manifestere sig i to forskellige kliniske former:

Den nosokomiale infektion er impliceret i 1 til 10% af tilfældene med nosokomial lungebetændelse.

Den smitsomme cyklus af L. pneumophila

Legionella pneumophila er i stand til at inficere vandamoeba såvel som alveolære makrofager og pneumocytter hos mennesker efter en lignende infektiøs cyklus.

Ved kontakt med værtscellen (amøbe eller makrofager) bruger L. pneumophila sin vigtigste virulensfaktor: dens type IV Dot / Icm sekretionssystem. Dette system gør det muligt for bakterierne at injicere mere end 300 bakterieproteiner kaldet effektorer direkte i cytoplasmaet hos dens vært. Disse proteiner gør det muligt for bakterien at aflede forskellige cellulære maskiner fra sin vært til sin fordel.

Nogle af disse effektorer er involveret i mekanismerne for indrejse i værtscellen via kapring af processerne med makropinocytose eller fagocytose. Disse bakterieproteiner er også nødvendige for, at bakterierne undgår nedbrydning ved værtens endosomale vej, især SidK-effektoren. De deltager også i oprettelsen af ​​en replikationsvakuol for bakterien, kaldet LCV for Legionella-holdig vacuol, som især er karakteriseret ved rekruttering af vesikler med oprindelse i det endoplasmatiske retikulum. Mange effektorer af Dot / Icm-systemet er involveret i denne proces: SidM / DrrA, SidC, RalF, LepB osv. Således camoufleret i LCV vil legionella være i stand til at formere sig eksponentielt, indtil den har opbrugt alle de tilgængelige ernæringsressourcer. Denne mangel udløser derefter en omprogrammering af den genetiske ekspression af bakterien, som derefter udtrykker dens virulensfaktorer (især effektorer af type IV-sekretionssystemet) og mobilitetsfaktorerne (flagellum). Bakterierne frigives derefter i værtens cytoplasma og derefter i det miljø, hvori de bliver nødt til at overleve, undertiden i form af biofilm, indtil en ny værtscelle er inficeret.

Hvad skal jeg gøre for at overvåge risikoen for Legionella?

For DHW-netværk:

Hvad skal jeg gøre, hvis ECS-netværket er inficeret?

Der er forskellige metoder, som sundhedsministeriet har testet og valideret for drikkevandsnetværk. Disse metoder findes i cirkulær 2002/243 afApril 2002. Vi finder især:

Chokket med hydrogenperoxid og sølv (H 2 O 2+ Ag), som består i at cirkulere opløsningen gennem hele netværket og forurenede punkter (når de ikke er i brug) i en koncentration fra 100 til 1000  mg / L hydrogenperoxid + ag i en kontakttid på op til 'kl. 12 . Ved afslutningen af ​​kontakttiden udføres en fuldstændig tømning af netværket. En af fordelene ved denne metode er at ødelægge biofilmen.

Klorchok består i at opnå en koncentration af frit klor på 15  mg / l i 24 timer eller på 30 til 50  mg / l i 2 til 3 timer ved niveauet af reservoirer. En fuldstændig tømning af netværket udføres efter at have ført det chlorerede vand gennem det maksimale eller endda alle anvendelsesstederne.

Den termiske chok udføres ved at hæve vandtemperaturen til 70  ° C i 30 minutter, og vandet skal strømme til alle punkter af brug i 5 til 10 minutter eller mere ved 65  ° C .

Risici forbundet med stød:

Legionella overvågning

For TAR'erne (køletårn eller luftkøletårn) sigter loven om folkesundhed fra 2004 om at reducere antallet af tilfælde af legionella med 50% for perioden 2004-2008. Dekreterne fra 2004 har udviklet sig gennem14. december 2013.

For DHW-netværk (varmt vand til boliger) er det nødvendigt at henvise til ordren fra1 st februar 2010(kontrol og forebyggelse af forurening af husholdningsvarmtvandsnet med legionella. Det synes logisk at følge amøber (som er en priori indikator og risikofaktor), men der kan være legionella uden amøber, og den almindelige metode til påvisning af amøbe er dyr, tidskrævende, og ikke alle laboratorier er udstyret til at tilbyde det, så det bruges ikke rutinemæssigt, men er nyttigt i tilfælde af overkontaminering efter behandling.

Overvågningen er derfor skrider frem i Frankrig, hvor det er blevet obligatorisk for mineralvand til terapeutisk brug (i termiske anlæg), i værelser med køletårne, i hvilken som helst varmt brugsvand netværk af en sundheds etablering eller sociale og medicinske institutioner. -SOCIALE, hoteller, turistboliger, campingpladser, fængselscentre og endelig alle offentlige bygninger med kollektive DHW-produktionsbrusere.
På1 st januar 2012udvides denne forpligtelse til at omfatte andre virksomheder, der er åbne for offentligheden (ERP).
DGS og DGPR anerkendte i 2009, at kulturmetoden (obligatorisk i Frankrig) pålægger en forsinkelse efter dyrkning (mindst 8 dages kultur er nødvendig, selvom mellemresultater er mulige og obligatoriske at blive leveret i tilfælde af at overstige mellem 3 og 5 dage), hvilket er skadeligt for den bedste forvaltning af installationerne og for optimeringen af ​​fristerne for ophævelse af restriktive vandforbrugsforanstaltninger. Derudover tager det ikke højde for alle former for Legionella, fordi der er et antal Legionella og andre levedygtige bakterier til stede i vand, men som vi ikke ved, hvordan man dyrker.
En udtalelse og en rapport (2011) fra ANSES 'kollektive ekspertise evaluerede metoderne til påvisning og optælling af legionella i vand og konkluderede, at kun to metoder er "tilstrækkeligt relevante og robuste"  ; den regulatoriske kulturmetode (NF T90 431-standard) og (hurtigere men ikke regulerende i ECS- og TAR-dekreter) kvantitativ PCR (NF T90 471-standard).

På nuværende tidspunkt er der intet bærbart system, der er i stand til at udføre optællingen af ​​Legionella.

Det er obligatorisk på DHW- og TAR-netværket gennem ECS Sanitaire Carnets eller TAR:

Bakteriologisk overvågning er obligatorisk (i et hospitalsmiljø udføres ofte af en biohygienikertekniker ):

Bortset fra mikrobiologiske prøver:

I sundhedsinstitutioner skal procedurerne vedrørende vandnet valideres af virksomhedens CLIN. I tilfælde af en alarm skal ledelsen og CLIN underrettes.

Beskyttelse

I tilfælde af teknisk indgriben på vandnettet skal personale beskyttes mod enhver aerosolisering af vand, især når der arbejdes på varmtvandsnetværket. FFP3-maske iført.

Handsker er unødvendige for beskyttelse mod Legionella. Legionellose er en strengt luftvejsinfektion, der er ingen Legionella hudinfektioner .

Bakteriologi

Bakterier af slægten Legionella er gramnegative baciller (men sjældent synlige ved direkte undersøgelse), de er mobile (1 eller 2 polære flageller ), streng aerob , svagt positiv katalase . Deres væg har det særlige ved at indeholde forgrenede umættede fedtsyrer . Disse bakterier er særligt krævende og kan kun dyrkes på specielle medier, der indeholder cystein og jern, såsom CYE-medium ( trækul , gærekstrakt ), GVPC-medium eller BCYE-medium ( bufret trækul gærekstrakt med cystein, jern og trækul. Aktiv, sort medium for at forhindre frie radikaler i at dræbe legionella in vitro .

BMPA alfa

Det er et dyrkningsmedium, der anvendes til selektiv isolering af Legionella; det kaldes også Legionella agar

Dekret, der regulerer risikoen for legionella på installationerne

Noter og referencer

  1. (in) Farhat M Trouilhe TM Brand E Moletta-Denat M Robine E, bror J, "Udvikling af en pilotskala 1 til eliminering af Legionella i biofilm i varmt vandnetværk: evaluering af varmechokbehandling" Journal of Applied Microbiology 2010; 108: 1073 -1082
  2. (i) Kuiper MW Wullings BA, ADL Akkermans, RR Beumer, Van der Kooij D, "intracellulær spredning af Legionella pneumophila i Hartmannella vermiformis i Aquatic Biofilm Grown er blødgjort polyvinylchlorid" Appl Microbiol Ca. . 2004; 70: 6826-6833
  3. (in) Bouyer S, C Imbert, Rodier MH Héchard Y, "Langvarig overlevelse af Legionella pneumophila associeret med Acanthamoeba castellanii vesikler" Ca. mikrobiol . 2007; 9: 1341-1344.
  4. (in) Brieland J, M McClain, LeGendre M, Engelberg C, "Intrapulmonal Hartmannella vermiformis en potentiel fordybning for Legionella pneumophila replikation i en murin model af legionellose" inficerer immun . 1997; 65: 4892-4896.
  5. (in) Baron PA, Willeke K "Vejrtrækningsdråber fra boblebade: målinger af størrelsesfordeling og estimering af potentiel sygdom" Ca. res . 1986; 39: 8-18.
  6. Bollin GE, Plouffe JF, Para MF, Hackman B (1985) Aerosoler indeholdende Legionella pneumophila frembragt af brusehoveder og varmtvandskraner. Anvendt og miljømikrobiologi 50, 1128-1131.
  7. (in) Skønhed J Zucs P, de Jong B; European Legionnaires 'Disease Surveillance Network et al. (77), "  Legionærsygdommen i Europa, 2009-2010  " , Euro Surveill , bind.  18, nr .  10,2013, s.  20417. ( PMID  23515061 , læs online [html] )
  8. Gennemgang af legionellosetilfælde, der opstod i Frankrig i 2013Invs-webstedet
  9. (i) Declerck P (2010) "Biofilm: legeplads for miljømæssige Legionella pneumophila" Ca. Microbiol. 12, 557-566.
  10. (i) Lee HJ, Ho MR, Bhuwan M, Hsu CY, Huang MS, Peng HL, Chang HY (2010) "Enhancing ATP-bakterier og biofilm detektering ved enzymatisk pyrophosphat regenerering" Analytical Biochemistry 399, 168-173
  11. (in) Murga R Forster TS, Brown E, Pruckler JM Fields BS, Donlan RM (2001) "Rollen af ​​biofilm i overlevelse af Legionella pneumophila i et drikkevandssystemmodel" Mikrobiologi 147, 3121-3126.
  12. (i) Moritz M. Flemming HC Wingender J (2010) "Integration af Pseudomonas aeruginosa og Legionella pneumophila i drikkevandsforsyninger biofilm dyrket én indenlandske VVS materialer" Int J Hyg Environ Health 213, 190-197.
  13. (in) Rogers J Dowsett AB, Dennis PJ, Lee JV, Keevil CW (1994) "Indflydelse på valg af temperatur og VVS-materiale er dannelse af biofilm og vækst af Legionella pneumophila i et model drikkevandssystem, der indeholder kompleks mikrobiel flora" Anvendt og miljømæssigt Mikrobiologi 60, 1585-1592.
  14. (in) Van der Kooij D Veenendaal HR WJH Scheffer (2005) "Biofilmdannelse og multiplikation af Legionella i et modelsystem med varmt vandrør af kobber, rustfrit stål og tværbundet polyethylen" Water Research 39, 2789-2798
  15. (in) Barer MR, Smith RJ, PR Cooney, Kimmitt PT (2000) "Forholdet mellem dyrkbarhed, aktivitet og virulens i patogene bakterier" J Infect.Chemother. 6, 108-111
  16. (in) Abu Kwaik Y, Gao LY, BJ Stone, Venkataraman C. Harb OS (1998) "Invasion of Protozoa by Legionella pneumophila and Its Role in Bacterial Pathogenesis and Ecology" Appl.Environ.Microbiol. 64, 3127-3133
  17. (in) Berk SG, Ting RS Turner GW Ashburn RJ (1998) "Produktion af åndedrætsblærer indeholdende levende celler af Two Legionella Acanthamoeba spp. » Appl.Environ.Microbiol. 64, 279-286.
  18. Udtalelse og ANSES-rapport om optælling af Legionella i vand; Anses, offentliggjort: 18. juli 2011
  19. (i) Campese C, D Bitar, Jarraud S, Maine C, F Forey, Stephen J., Desenclos AD Saura C. Che D. (2010) "Fremskridt i overvågning og kontrol af Legionella-infektion i Frankrig fra 1998 til 2008" Int J Inficér Dis.
  20. Laurent Radisson, “Legionella i vand: ANSES lister detektionsmetoder” Bulletin d'Actu-Environnement  ; 10. august 2011
  21. (in) Byrd JJ, Xu HS, Colwell RR (1991) "Levedygtigt mål ikke-dyrkbare bakterier i drikkevand" Appl Microbiol Ca. 57, 875-878.
  22. (in) Ballard AL Fry NK Chan L Surman SB, Lee JV, TG Harrison, KJ Towner (2000) "Påvisning af Legionella pneumophila ved anvendelse af et realtids-PCR-hybridiseringsassay" J. Clin. Mikrobiol. 38, 4215-4218
  23. Dekret af 14. december 2013 om de generelle krav, der gælder for anlæg, der er omfattet af registreringsordningen under pos. 2921 i nomenklaturen for anlæg, der er klassificeret til miljøbeskyttelse ( læs online )

Se også

Relaterede artikler

eksterne links

Bibliografi

  1. Olivier Dauptain, Sammenlignende Guide af dekreterne 2004-2014 - Udviklingen i sektion 2921 - Legionella risikostyring køletårne - co-skrevet med P.Rambeau , Frankrig, Anexo udgave,2014, 60  s. ( ISBN  978-2-9548250-0-7 )